梅里埃革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定卡GN說(shuō)明書(shū)：

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)：革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定卡

英文名稱(chēng)：VITEK 2 Gram-Negative Identification Card (VITEK 2 GN Test Kit)

【包裝規(guī)格】

20 測(cè)試/盒

【預(yù)期用途】

該產(chǎn)品用于自動(dòng)鑒定有臨床意義的發(fā)酵和非發(fā)酵革蘭陰性桿菌。

該產(chǎn)品與 VITEK® 2 系統(tǒng) 一起使用用于自動(dòng)鑒定大多數(shù)有臨床意義的發(fā)酵和非發(fā)酵革蘭陰性桿菌。革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定卡（以下簡(jiǎn)稱(chēng) GN 卡）僅供一次性使用，該卡能鑒定的細(xì)菌見(jiàn)附表 1：GN 卡鑒定的細(xì)菌。

【檢驗(yàn)原理】

GN 卡根據(jù)已有的生化方法 1,2,4,8-9,10,11,12,17,18,20,21,24,25,27，和新研發(fā)的底物來(lái)檢測(cè)碳源的利用、酶活性和耐

藥性。卡片上有 47 個(gè)生化試驗(yàn)，一個(gè)陰性對(duì)照孔。脫羧酶陰性對(duì)照孔（52 號(hào)孔）用來(lái)作為脫羧酶試驗(yàn)的基礎(chǔ)值參考。最終結(jié)果可于 10 小時(shí)內(nèi)獲得。

【主要組成成份】

詳見(jiàn)附表 2：GN 反應(yīng)孔內(nèi)容物。

注：表中未注明的編號(hào)在 1 和 64 之間的其它反應(yīng)孔為空白。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

在 2℃～8℃的條件下封閉儲(chǔ)存于原包裝盒內(nèi)。有效期 12 個(gè)月。

生產(chǎn)日期：詳見(jiàn)外包盒標(biāo)簽。

有效期至：詳見(jiàn)外包盒標(biāo)簽。

【適用儀器】

全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析儀（VITEK 2 System）型號(hào)：VITEK 2， VITEK 2 XL

全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（VITEK 2 Compact System）型號(hào)：VITEK 2 Compact

GN 卡與 VITEK 2 儀器配合使用，可作為日常常見(jiàn)的發(fā)酵和非發(fā)酵革蘭陰性菌鑒定的完整系統(tǒng)，所需

材料如下：

? VITEK® 2 GN 卡

? VITEK® 2 DENSICHEK 電子比濁儀或 VITEK® 2 DENSICHEK 常見(jiàn)套件

? DensiCHEK Plus Standards Kit 電子比濁儀標(biāo)準(zhǔn)濁度管或 DENSICHEK 管 K 標(biāo)準(zhǔn)套件

? VITEK® 2 卡架

? 樣本稀釋液（0.45%～0.50%NaCl, pH4.5～7.0）

? 12mm×75mm 清潔一次性塑料管（聚苯乙烯）

? 無(wú)菌棒或拭子

? 合適的瓊脂培養(yǎng)基（參見(jiàn)附表 3：培養(yǎng)要求表）

可選配件：

? 容積可調(diào)式鹽水分配器

? 接種環(huán)

? 預(yù)裝樣本稀釋液的試管（0.45% 至 0.50% NaCI 溶液，pH 4.5 至 7.0）

? 試管蓋

? 渦旋震蕩器

【樣本要求】

欲詳細(xì)了解樣本準(zhǔn)備信息，請(qǐng)參見(jiàn)附表 3：培養(yǎng)要求表。

革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定卡GN檢驗(yàn)方法：

警告：未遵守本部分有關(guān)執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室任務(wù)的說(shuō)明和建議，可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤或延遲。欲詳細(xì)了解產(chǎn)品具體信息，請(qǐng)參見(jiàn)培養(yǎng)要求表。

見(jiàn)適用儀器使用手冊(cè)。

注：按標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室規(guī)程用純培養(yǎng)物制備接種物，如果是混合培養(yǎng)物，需重新進(jìn)行分純。建議使用菌純度確認(rèn)平板，以確保用于試驗(yàn)的是純培養(yǎng)物。

1） 完成以下某項(xiàng)操作：

• 如果符合培養(yǎng)要求，從原代培養(yǎng)板上選擇分離的菌落。

• 將要測(cè)試的細(xì)菌轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)沫傊囵B(yǎng)基上傳代培養(yǎng)和相應(yīng)孵育。

2） 以無(wú)菌方法，將 3.0mL 無(wú)菌鹽水（0.45%至 0.50%NaCl 溶液，pH 4.5 至 7.0）加入一個(gè)透明的塑料（聚苯乙烯）試管（12 mm x 75 mm）中。

3） 用無(wú)菌棒或拭子向在第 2 步中準(zhǔn)備的鹽水試管挑取足量形態(tài)類(lèi)似的菌落。用經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)的 VITEK® 2 DensiCHEK™ Plus 或 VITEK® 2 DensiCHEK™按相當(dāng)于 McFarland No. 0.50 至 0.63 的濁度準(zhǔn)備均質(zhì)菌懸液。

注：配置好的菌懸液在接種試卡前，放置不能超過(guò) 30 分鐘。

4） 將菌懸液試管和 GN 卡放入卡架中。

5） 參閱適當(dāng)?shù)膬x器使用手冊(cè)，了解數(shù)據(jù)輸入說(shuō)明和如何向儀器中裝載卡架。

6） 丟棄危險(xiǎn)性廢物時(shí)請(qǐng)遵循所在地監(jiān)管機(jī)構(gòu)的指南。

質(zhì)量控制

質(zhì)控株與其期望結(jié)果列于 VITEK 2 GN 質(zhì)控表中，根據(jù)本文件中規(guī)定的試驗(yàn)菌株操作質(zhì)量控制。

認(rèn)證聲明

茲此證明, bioMerieux 符合 ISO 13485 和 FDA 質(zhì)量體系規(guī)范（QSR）關(guān)于微生物鑒定系統(tǒng)設(shè)計(jì)、開(kāi)發(fā)和制造的要求。

試驗(yàn)頻率

目前，建議遵循監(jiān)管機(jī)構(gòu)有關(guān)鑒定產(chǎn)品試驗(yàn)頻率指南。

通常做法是，在收到試劑盒時(shí)實(shí)施 QC。反應(yīng)必須符合使用說(shuō)明結(jié)果。

如果結(jié)果不符合這些標(biāo)準(zhǔn)，可以傳代培養(yǎng)分純，重復(fù)試驗(yàn)。如果結(jié)果仍然不符合標(biāo)準(zhǔn)，采用其它鑒定方法，并聯(lián)系 bioMerieux。

質(zhì)控菌試驗(yàn)和儲(chǔ)存

? 依廠(chǎng)商說(shuō)明復(fù)溶菌株；

? 采用含 5%羊血的大豆瓊脂 (TSAB)。在需氧條件下以 35℃至 37℃溫度孵育約 18 至 24 小時(shí)；

? 檢查純度。實(shí)施第二次傳代培養(yǎng)，以便試驗(yàn)。

? 采用含 5%羊血的大豆瓊脂 (TSAB)。在需氧條件下以 35℃至 37℃溫度孵育約 18 至 24 小時(shí)

儲(chǔ)存條件

短期保存條件

1） 以劃線(xiàn)方式接種至 TSAB 平板或斜面上；35℃～37℃孵育 24 小時(shí)；

2） 2℃～8℃冷藏至多 2 周；

3） 按上述要求傳代培養(yǎng)一次，以便用于質(zhì)量控制。

長(zhǎng)期保存條件

1） 用含 15% 甘油的大豆肉湯(TSB)配制濃菌懸液；

2） - 70℃冷凍保存；

3） 實(shí)施質(zhì)量控制之前，用 TSAB 實(shí)施兩次傳代培養(yǎng)。

注：避免反復(fù)凍融，把冷凍保存菌株分裝為單份使用或用無(wú)菌棒從冷凍保存的菌中取出少部分使用。

精簡(jiǎn)質(zhì)量控制

注：只限工業(yè)使用的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該遵循精簡(jiǎn)質(zhì)量控制部分中的內(nèi)容實(shí)施質(zhì)量控制。這些用戶(hù)無(wú)需額外試

驗(yàn)。

因?yàn)椴缓菀自谶\(yùn)輸條件下降解的底物，可以通過(guò)試驗(yàn)兩個(gè)菌株實(shí)施精簡(jiǎn)質(zhì)量控制：在 GN上，一個(gè)在大多數(shù)情況是陽(yáng)性，另外一個(gè)在大多數(shù)情況是陰性。請(qǐng)參見(jiàn) GN 質(zhì)量控制表。

全面質(zhì)量控制

不符合精簡(jiǎn)質(zhì)量控制測(cè)試要求的客戶(hù)，需要實(shí)施全面質(zhì)量控制試驗(yàn)，以便證明針對(duì)某鑒定產(chǎn)品的每種底物的陽(yáng)性和陰性反應(yīng)。

欲在開(kāi)始就符合精簡(jiǎn)質(zhì)量控制測(cè)試要求，CLSI® M50-A 標(biāo)準(zhǔn)要求用戶(hù)實(shí)施和記錄以下兩項(xiàng)中的一項(xiàng)：5

•完成驗(yàn)證試驗(yàn)，以證明其性能符合制造商聲稱(chēng)的性能。

•實(shí)施全面質(zhì)量控制測(cè)試，應(yīng)該在至少三個(gè)不同季節(jié)至少對(duì)三批產(chǎn)品實(shí)施。

請(qǐng)參閱完整的 CLSI® M50-A 標(biāo)準(zhǔn)，了解如何保持符合要求，以及精簡(jiǎn)質(zhì)量控制測(cè)試對(duì)于用戶(hù)和制造商雙方的要求和責(zé)任。

GN 質(zhì)量控制表

Enterobacter hormaechei 霍氏腸桿菌 ATCC® 700323™（用于精簡(jiǎn)或全面質(zhì)量控制)

Stenotrophomonas maltophilia 嗜麥芽窄食單胞菌 ATCC® 17666™（用于精簡(jiǎn)或全面質(zhì)量控制)

Acinetobacter baumannii 鮑曼不動(dòng)桿菌 ATCC® BAA-747™（用于全面質(zhì)量控制)

Elizabethkingia meningoseptica 腦膜膿毒性伊麗莎白金菌 ATCC® 13253（用于全面質(zhì)量控制)

Klebsiella oxytoca 產(chǎn)酸克雷伯菌 ATCC® 700324™（用于全面質(zhì)量控制)

Ochrobactrum anthropi 人蒼白桿菌 ATCC® BAA-749™（用于全面質(zhì)量控制)

Proteus vulgaris 普通變形菌 ATCC® 6380™ (用于全面質(zhì)量控制)

Pseudomonas aeruginosa 銅綠假單胞菌 ATCC® 9721™ (用于全面質(zhì)量控制)

Pseudomonas aeruginosa 銅綠假單胞菌 ATCC® BAA-1744™ (用于全面質(zhì)量控制)

注：Pseudomonas aeruginosa 銅綠假單胞菌 ATCC® BAA-1744™ 可能含有兩種形態(tài)各異的菌落，但做質(zhì)控時(shí)兩種菌落都符合預(yù)期反應(yīng)結(jié)果。

適用于 7.01 軟件用戶(hù)

Shigella sonnei 索氏志賀菌 ATCC®25931™（用于全面質(zhì)量控制）

適用于 8.01 或以上軟件版本用戶(hù)

Escherichia coli 大腸埃希菌 ATCC®25922™（用于全面質(zhì)量控制）

鑒定質(zhì)量控制細(xì)菌時(shí)，GN 卡的結(jié)果通常是單選，或在低分辨率或相似細(xì)菌鑒定結(jié)果內(nèi)。由于是根據(jù)反應(yīng)性能而不是鑒定性能選擇的質(zhì)控菌株，因此，在所有預(yù)期質(zhì)量控制反應(yīng)均正確時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)不能鑒定或鑒定錯(cuò)誤的結(jié)果。